viernes, 16 de marzo de 2012

ELECTROFORESIS DE PROTEINAS


ELECTROFORESIS DE PROTEINAS

La electroforesis es una técnica que permite la separación de moléculas en un soporte sometido a un campo eléctrico. Sus aplicaciones son numerosas, siendo importante su papel en el análisis de las proteínas presentes en el suero y otros líquidos biológicos. Por ello es muy útil para el diagnóstico y seguimiento de patologías relacionadas con el cáncer, la búsqueda de anomalías del sistema inmunitario o en el estudio de hemoglobinas


PROTEINAS
Las proteínas son macromoléculas compuestas de aminoácidos.

Las proteínas pueden estar cargada positiva o negativamente (de acuerdo a su composición de aminoácidos y el pH del medio ambiente).

Las proteínas son los principales componentes de nuestro cuerpo y juegan varios roles (transporte estructurales, de regulación, defensa ...)

En el diagnóstico clínico, análisis de proteínas en diversos líquidos biológicos se pueden realizar: la sangre (glóbulos rojos o en suero), orina, líquido cefalorraquídeo (LCR).



PRINCIPIO DE ELECTROFORESIS DE PROTEINAS


La electroforesis es la separación de moléculas cargadas en un campo eléctrico.

Las Moléculas migran hacia el ánodo (+) o el cátodo (-) de acuerdo a su carga.

 Las proteínas pueden ser separados utilizando un medio tamponado sólido (electroforesis de agarosa) o en fase líquida (electroforesis capilar).



PRINCIPALES FRACCIONES DE PROTEINAS



 CUAL ES EL PROPOSITO DE REALIZAR UNA ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
  • Para detectar anomalías en las proteínas del suero:


    Cuantitativas: aumento o disminución de algunas fracciones
    Cualitativas: la presencia de la fracción o fracciones anormales

  • Confirmar el diagnóstico patológico en asociación con otros parámetros: la inflamación, la hepatitis, la cirrosis o el perfil de nefrótico.

  • Identificar la presencia de una inmunoglobulina monoclonal, cuando se sospecha de un mieloma con signos clínicos

  • Permiten una detección precoz del mieloma asintomático.

     
  • Para monitorear la evolución de la enfermedad maligna o seguir la eficacia del tratamiento inmunosupresor.

     
FRACCIONES








SUERO NORMAL





PRINCIPALES PATOLOGIAS





Condiciones o enfermedades relacionadas con los cambios de patrón de electroforesis de proteínas séricas

Disminucion Incremento Pico adicional
Albumin - Nephrotic syndrome    
- Gastroenteropathies
- Lymphoproliferative syndrom
- Malnutrition, denutrition
- Hepatocellular insufficiency
- Inflammation    
- Dehydration
- Hemoconcentration
- Bisalbumi-nemia(Conge-nital, drug,
pancreatitis)
Alpha 1 - Protein losses
- Hepatocellular insufficiency
- Congenital deficiency of A1AT
- Inflammation -A1AT phenotype
Alpha 2 - Hepatocellular insufficiency
- Intravascular hemolysis



  • Inflammation
  • Nephrotic syndrome
    - Free light chain disease



  • Myeloma
  • Lymphoma
  • Leukemia
  • MGUS



  • DISMINUCIONINCREMENTOPICO ADICIONAL
    Beta- Hepatocellular insufficiency
    - C3 chronic deficiency, C3 hyperconsumption
    - Aging sample (C3 degradation)
    - Biliary obstruction
    - Nephrotic syndrome (only on gel)
    - Cirrhosis



  • Iron deficiency anemia
  • Strong hemolysis
    - Myeloma, lymphoma…



  • Myeloma
  • Lymphoma
  • Leukemia
  • MGUS
  • Gamma - Immunodeficiency
    - Immunosuppressive treatment
    - Free light chain disease
    - Inflammation



  • Cirrhosis
  • Myeloma
  • Lymphoma
  • Leukemia



  • Myeloma
  • Lymphoma
  • Leukemia
  • MGUS



  • INFLAMACION
    • Inflamación aguda asociada con:
      -aumento de a1 y a2 globulinas
      debido a un aumento de: orosomucoide, alfa-1 antitripsina y haptoglobina.

      Inflamación crónica asociada con:
      - Aumento de la alfa-1, alfa-2 globulinas y un aumento policlonal de las gammaglobulinas
      - Disminución de la albúmina, globulinas beta (debido a una disminución de la transferrina.)


    INFLAMACION AGUDA


    INFLAMACION CRONICA


    SINDROME NEFROTICO
    Esta enfermedad está asociada con:
    - Una disminución de la albúmina, alfa-1 globulinas
    - Un aumento de la alfa-2 globulinas (debido a un aumento de la macroglobulina alfa-2).
    - El gel: aumento de las globulinas beta (debido a un aumento de las lipoproteínas beta en la nefrosis lipoidea);
    - En los sistemas capilares: las lipoproteínas de migrar dentro de la fracción albúmina ningún aumento de las globulinas beta, pero la deformación de la fracción de albúmina puede ocurrir







    CIRROSIS
    • Esta enfermedad está asociada con:
      - Una disminución de la albúmina, alfa-1 y globulinas alfa-2 (debido a la insuficiencia hepatocelular)
      - Un aumento policlonal de las gammaglobulinas beta-(beta-gamma puente debido al aumento policlonal de Ig A en beta)
    PUENTE BETA-GAMMA


    HIPOGAMMAGLOBULINEMIA
    • Disminución de las inmunoglobulinas policlonales en la zona gamma

      Se asocia con:
      - Parcial o total de la inmunodeficiencia
      - El tratamiento inmunosupresor
      - Enfermedad de las cadenas ligeras libres o mieloma no secretor





    HIPERGAMMAGLOBULINEMIA
    • Aumento de las inmunoglobulinas policlonales en la zona gamma

      Se asocia con:
      - Inflamación
      - Cirrosis
      - Infecciones subaguda y crónica




    Posición de una inmunoglobulina monoclonal en la electroforesis de proteínas séricas
    • Proteínas monoclonales generalmente migran como homogéneo y banda estrecha (picos)

      Principalmente en la zona gamma

      Con menos frecuencia en otras zonas (beta o alfa-2)







     

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